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基礎(chǔ)篇-無菌操作基本技術(shù)1.實驗進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物...

近看到不少問有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)污染的事，正好我看到了一個有關(guān)這方面的總結(jié)，很全很好很強大，跟大家分享下細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:常見的污染如下：1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液...

生物刺激素肯定不是所謂的植物生長調(diào)節(jié)劑，植物生長調(diào)節(jié)劑也就是俗稱的激素，是指人們根據(jù)植物內(nèi)源激素的原理和功能進(jìn)行人工合成的化學(xué)物質(zhì)，當(dāng)然不排除有個別企業(yè)也添加植物生長調(diào)節(jié)劑。而真正意義上的生物刺激素主要是天然物質(zhì)經(jīng)過提取或是分解得到的產(chǎn)物，對植物具有生理活性的物質(zhì)，甚至有些可以直接刺激植物內(nèi)源激素的形成，主要的種類有腐植酸、氨基酸、微生物、甲殼素類、海藻提取物以及其他的一些植物提取物，其中應(yīng)用廣泛的是氨基酸、腐植酸、海藻提取物這三類。很多壇友會奇怪，氨基酸、腐植酸、海藻提取物...

1、熒光免疫測定技術(shù)的概念：將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，測定復(fù)合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)，稱為免疫熒光素技術(shù)。2、熒光的產(chǎn)生：物質(zhì)吸收外界能量而進(jìn)入激發(fā)狀態(tài)，在回復(fù)基態(tài)時多余的能量以電磁輻射的形式釋放，即發(fā)光，這種光稱為熒光。這種物質(zhì)，稱為熒光素。由光激發(fā)所引起的熒光，為光致熒光------熒光免疫技術(shù)由化學(xué)反應(yīng)所引起的熒光，為化學(xué)熒光------化學(xué)發(fā)光技術(shù)3、熒光素的熒光特性：⑴停止供能，熒光現(xiàn)象隨即終止⑵對光的吸收和熒光的...

一般我們購買商品化的primaryantibody的時候，抗體的說明書中都會給我們一個推薦的抗體使用濃度。這個濃度在一定程度上來說，是過飽和的，可以滿足大多數(shù)實驗的染色需求。但是因為是過飽和的濃度，這就帶來了一定程度的抗體浪費。而過量的抗體，也會大大提高樣本的自發(fā)熒光。從另一個角度來看，因為廠家給出的推薦濃度都是基于一個特定的樣本濃度和樣本體積，所以在一些特殊的實驗中，比如樣本濃度或樣本體積過大的實驗，推薦的濃度就無法達(dá)到飽和滴加的要求。在這樣的前提下，推薦實驗用戶針對自己的...

1.實驗進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取...

MEM細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是實驗室里常見和基本的實驗了，但卻不是簡單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊含著大學(xué)問。有時候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)...

一、ELISA實驗中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中。2、采血后室溫靜置1小時。3、將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下，可放置保存24-48小時；-20℃下，可放置保存1個月；-70℃下，可放置保存6個月。5、根據(jù)你的實驗需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶...